Ni dividis plurajn konsiderojn pasintsemajne por uzi celulozan acetatmembran elektroforezon, kaj ni finos ĉi tiun temon ĉi tie hodiaŭ por via referenco.
Elekto de Buffer-Koncentriĝo
La bufrokoncentriĝo uzita en celuloza acetatmembranelektroforezo estas ĝenerale pli malalta ol tiu uzita en paperelektroforezo.La komune uzata pH 8.6Barbitala bufro estas tipe elektita ene de la intervalo de 0.05 mol/L ĝis 0.09 mol/L.Elektante la koncentriĝon, oni faras antaŭan determinon.Ekzemple, se la longo de la membrano-strio inter la elektrodoj en la elektroforezkamero estas 8-10cm, tensio de 25V estas postulata por centimetro de membranlongo, kaj la nuna intenseco devus esti 0.4-0.5 mA je centimetro de membranlarĝo.Se ĉi tiuj valoroj ne estas atingitaj aŭ superitaj dum elektroforezo, la bufrokoncentriĝo devus esti pliigita aŭ diluita.
Troe malalta bufrokoncentriĝo rezultigos rapidan movadon de la grupoj kaj pliiĝon en bendolarĝo.Aliflanke, troe alta bufrokoncentriĝo malrapidigos la grupmigradon, malfaciligante distingi certajn apartiggrupojn.
Oni devas rimarki, ke en celuloza acetato-membranelektroforezo, signifa parto de la fluo estas kondukita tra la specimeno, kiu generas konsiderindan kvanton da varmo.Foje, la elektita bufrokoncentriĝo povas esti konsiderita taŭga.Tamen, en kondiĉoj de pliigita media temperaturo aŭ kiam uzado de pli alta tensio, la vaporiĝo de akvo pro la varmo povas intensiĝi, rezultigante tro altan bufran koncentriĝon kaj eĉ igante la membranon sekiĝi.
Specimena Volumo
En celuloza acetata membranelektroforezo, la kvanto de provaĵovolumeno estas determinita de diversaj faktoroj, inkluzive de elektroforezkondiĉoj, trajtoj de la provaĵo mem, makulaj metodoj kaj detekteknikoj.Kiel ĝenerala principo, ju pli sentema la detekta metodo, des pli malgranda la specimena volumo povas esti, kio estas avantaĝa por apartigo.Se la specimena volumeno estas troa, la elektroforetikaj apartigpadronoj eble ne estas klaraj, kaj makulado ankaŭ povas esti tempopostula.Tamen, kiam kvante analizado de la apartigitaj makulitaj bendoj uzante eluciajn kolorimetrajn detektmetodojn, la provaĵovolumeno ne devus esti tro malgranda, ĉar ĝi povas rezultigi pli malaltajn absorbadvalorojn por certaj komponentoj, kondukante al pli altaj eraroj en kalkulado de ilia enhavo.En tiaj kazoj, la specimena volumo devus esti taŭge pliigita.
Tipe, la specimena volumo aldonita sur ĉiu centimetro de la specimena aplika linio varias de 0,1 ĝis 5 μL, ekvivalenta al specimena kvanto de 5 ĝis 1000 μg.Ekzemple, en rutina serumproteina elektroforeza analizo, la specimena volumo aldonita sur ĉiu centimetro de la aplika linio ĝenerale ne superas 1 μL, ekvivalentan al 60 ĝis 80 μg da proteino.Tamen, dum analizado de lipoproteinoj aŭ glikoproteinoj uzante la saman elektroforezmetodon, la provaĵovolumeno devas esti ekvivalente pliigita.
En konkludo, la plej taŭga specimena volumeno devus esti elektita surbaze de specifaj kondiĉoj per serio de preparaj eksperimentoj.
Elekto de Makula Solvo
La separitaj grupoj en celuloza acetatmembranelektroforezo estas tipe makulitaj antaŭ detekto.Malsamaj specimenaj komponantoj postulas malsamajn makulajn metodojn, kaj la makulaj metodoj taŭgaj por celuloza acetata membranelektroforezo eble ne estas tute aplikeblaj al filtrila papero.
Estas tri ĉefaj principoj por elekti makulan solvonmembrano de celuloza acetato.Unue,Akvosolveblaj tinkturfarboj devus esti preferitaj ol alkohol-solveblaj tinkturfarboj por eviti membranŝrumadon kaj deformadon kaŭzitan de la lasta makula solvo.Post makulado, gravas lavi la membranon per akvo kaj minimumigi la daŭron de makulado.Alie, la membrano povas iĝi krispigita aŭ ŝrumpita, kio influus postan detekton.
Due, estas preferinde elekti tinkturfarbojn kun forta makula afineco por la specimeno.En celuloza acetata membranelektroforezo de serumproteinoj, amino nigra 10B estas ofte uzata pro sia forta makula afineco por diversaj serumproteinkomponentoj kaj ĝia stabileco.
Trie, fidindaj kvalitaj tinkturfarboj devas esti elektitaj.Kelkaj tinkturfarboj, malgraŭ havado de la sama nomo, povas enhavi malpuraĵojn kiuj rezultigas precipe malhelan fonon post makulado.Tio eĉ povas malklarigi la origine bone apartigitajn bendojn, igante ilin malfacilaj distingi.
Finfine, la elekto de makula solvkoncentriĝo estas grava.Teorie, ĝi povus ŝajni, ke pli alta makula solvkoncentriĝo kondukus al pli ĝisfunda makulado de specimenaj komponantoj kaj pli bonaj makulaj rezultoj.Tamen, ĉi tio ne estas la kazo.La liga afineco inter la specimenaj komponantoj kaj la tinkturfarbo havas certan limon, kiu ne pliiĝas kun la pliiĝo de la koncentriĝo de makula solvaĵo.Male, tro alta makula solvkoncentriĝo ne nur malŝparas la tinkturfarbon sed ankaŭ malfaciligas atingi klaran fonon.Plie, kiam la kolorintenseco atingas certan maksimuman valoron, la sorba kurbo de la tinkturfarbo ne sekvas linearan rilaton, precipe en kvantaj mezuradoj.En celuloza acetato-membranelektroforezo, la makula solvkoncentriĝo estas ĝenerale pli malalta ol tiu uzata en papera elektroforezo.
Detaloj scii pri Beijing Liuyi Biotechnology's membrano de celuloza acetatoelektroforeza tanko kaj ĝia elektroforeza aplikaĵo, bonvolu viziti ĉi tie:
lEksperimento por apartigi serumproteinon per Celuloza Acetata Membrano
lCeluloza Acetato Membrana Elektroforezo
lPluraj Konsideroj Devas Esti Konsiderataj Kiam Uzado de Celuloza Acetata Membrana Elektroforezo (1)
Se vi havas aĉetan planon por niaj produktoj, bonvolu ne hezitu kontakti nin.Vi povas sendi al ni mesaĝon retpoŝte[retpoŝto protektita]aŭ[retpoŝto protektita], aŭ bonvolu voki nin ĉe +86 15810650221 aŭ aldoni Whatsapp +86 15810650221, aŭ Wechat: 15810650221.
Referenco:Elektroforezo (Dua eldono) de S-ro Li
Afiŝtempo: Jun-06-2023