Comet Assay (Single Cell Gel Electrophoresis, SCGE) estas sentema kaj rapida tekniko ĉefe uzata por detekti DNA-difekton kaj ripari en individuaj ĉeloj. La nomo "Comet Assay" venas de la karakteriza kometa formo, kiu aperas en la rezultoj: la kerno de la ĉelo formas la "kapon", dum la difektitaj DNA-fragmentoj migras, kreante "voston" similan al kometo.
Principo
La principo de la Kometa Testo baziĝas sur la migrado de DNA-fragmentoj en elektra kampo. Nerompita DNA restas ene de la ĉelkerno, dum difektita aŭ fragmenta DNA migras al la anodo, formante la "voston" de la kometo. La longo kaj intenseco de la vosto estas rekte proporciaj al la amplekso de DNA-difekto.
Proceduro
- Ĉela Preparado: Testotaj ĉeloj estas miksitaj kun malalt-fandpunkto agarozo kaj disvastigitaj sur mikroskopbildoj por formi unuforman tavolon.
- Ĉela Lizo: La lumbildoj estas mergitaj en lizsolvo por forigi la ĉelmembranon kaj nuklean membranon, eksponante la DNA.
- Elektroforezo: La lumbildoj estas metitaj en elektroforezkameron sub alkalaj aŭ neŭtralaj kondiĉoj. Difektitaj DNA-fragmentoj migras al la pozitiva elektrodo sub la influo de la kampo.
- Makulado: Post elektroforezo, la diapozitivoj estas makulitaj per fluoreska tinkturfarbo (ekz. etidiobromido) por bildigi la DNA.
- Mikroskopa Analizo: Uzante fluoreskecmikroskopon aŭ specialecan softvaron, la kometformoj estas analizitaj, kaj parametroj kiel ekzemple vostolongo kaj intenseco estas mezuritaj.
Bildo de biorender
Analizo de datumoj
Rezultoj de la Comet Assay estas taksitaj surbaze de pluraj ŝlosilaj parametroj:
- Vosto Longo: Reprezentas la distancon, kiun la DNA migras, indikante la amplekson de DNA-difekto.
- Vosto DNA Enhavo: La procento de DNA kiu migras en la voston, ofte uzata kiel kvanta mezuro de DNA-difekto.
- Olive Tail Moment (OTM): Kombinas kaj vostolongon kaj vostan DNA-enhavon por disponigi pli ampleksan mezuron de DNA-damaĝo.
Aplikoj
- Studoj pri Genotokseco: La Comet Assay estas vaste uzata por taksi la efikojn de kemiaĵoj, medikamentoj kaj radiado sur ĉela DNA, igante ĝin ŝlosila ilo por genotoksectestado.
- Media Toksologio: Ĝi helpas analizi la efikon de mediaj malpurigaĵoj sur la DNA de organismoj, provizante sciojn pri ekosistemsekureco.
- Medicina kaj Klinika Esploro: La Comet Assay estas uzata en studado de DNA-riparmekanismoj, kancero, kaj aliaj DNA-rilataj malsanoj. Ĝi ankaŭ taksas la efikon de kancero-terapioj kiel radioterapio kaj kemioterapio sur DNA.
- Sciencoj pri Nutrado kaj Agrikulturo: Uzita por taksi la sekurecon de insekticidoj, manĝaldonaĵoj kaj aliaj substancoj, kaj por studi iliajn toksajn efikojn en bestaj modeloj.
Avantaĝoj
- Alta Sentemo: Kapabla detekti malaltajn nivelojn de DNA-damaĝo.
- Simpla Operacio: La tekniko estas simpla, igante ĝin taŭga por altprodukta rastrumo.
- Larĝa Apliko: Ĝi povas esti aplikata al diversaj ĉeltipoj, inkluzive de bestaj kaj plantaj ĉeloj.
- Kvantifikaj Defioj: Disponante kvalitajn datenojn pri DNA-difekto, kvanta analizo dependas peze de softvaro kaj bildanalizteknikoj.
- Eksperimentaj Kondiĉoj: Rezultoj povas esti influitaj de faktoroj kiel elektroforeztempo kaj pH, postulante zorgeman kontrolon de eksperimentaj kondiĉoj.
Limigoj
La Kometa Testo estas valorega ilo en biomedicina esplorado, mediscienco, kaj drog-evoluo pro sia fleksebleco kaj alta sentemo en detektado de DNA-damaĝo kaj riparo. Beijing Liuyi Biotechnology Co. Ltd (Liuyi Biotechnology)ofertas horizontalan elektroforezkameron por kometa analizo. Bonvenon kontakti nin por diskuti pri laKometa Testoprotokolo.
Beijing Liuyi Biotechnology Co Ltd (Liuyi Biotechnology) specialiĝis pri fabrikado de elektroforezaj instrumentoj dum pli ol 50 jaroj kun nia propra profesia teknika teamo kaj R&D-centro. Ni havas fidindan kaj kompletan produktadlinion de dezajno ĝis inspektado, kaj magazeno, kaj ankaŭ merkatan subtenon. Niaj ĉefaj produktoj estas Electrophoresis Cell (tanko/ĉambro), Elektroforezo Elektroprovizo, Blua LED Transilluminator, UV Transilluminator, Ĝelo Bildo & Analiza Sistemo ktp Ni ankaŭ provizas la laboratoriaj instrumentoj kiel PCR-instrumento, vortico-miksilo kaj centrifugilo por laboratorio.
Se vi havas aĉetan planon por niaj produktoj, bonvolu ne hezitu kontakti nin. Vi povas sendi al ni mesaĝon retpoŝte[retpoŝto protektita]aŭ[retpoŝto protektita], aŭ bonvolu voki nin ĉe +86 15810650221 aŭ aldoni Whatsapp +86 15810650221, aŭ Wechat: 15810650221.
Bonvolu Skani la QR-kodon por aldoni ĉe Whatsapp aŭ WeChat.
Afiŝtempo: Sep-20-2024