Optimumigo de ĝela elektroforezo: Plej bonaj Praktikoj por Specimena Volumo, Tensio kaj Tempo

Enkonduko

Gelelektroforezo estas fundamenta tekniko en molekula biologio, vaste uzata por la apartigo de proteinoj, nukleaj acidoj kaj aliaj makromolekuloj. Ĝusta kontrolo de specimena volumeno, tensio kaj elektroforeztempo estas decida por atingi precizajn kaj reprodukteblajn rezultojn.Nia laboratoriokolego proponasplej bonaj praktikoj por administri ĉi tiujn parametrojn dum SDS-PAGE-ĝelelektroforezo.

3

Beijing Liuyi Biotechnology ĝelo elektroforezo produktoj

Specimena Volumo: Certigante Konsistencon

Kiam vi faras elektroforezon de SDS-PAGE, la specimena volumo estas ŝlosila faktoro, kiu povas grave influi la rezolucion de viaj rezultoj. Ĝenerale rekomendas ŝarĝi 10 µL da totala proteino per puto. Por certigi konsistencon kaj malhelpi specimenan disvastigon inter apudaj putoj, estas grave ŝarĝi egalan volumon de 1x ŝarĝa bufro en iuj malplenaj putoj. Ĉi tiu antaŭzorgo helpas malhelpi la disvastigon de specimenoj en najbarajn lenojn, kio povas okazi se la puto estas lasita malplena.

Antaŭ ol ŝarĝi viajn specimenojn, ĉiam komencu per aldono de molekula pezo markilo al unu puto. Tio permesas facilan identigon de proteingrandecoj post elektroforezo.

1

Tensia Kontrolo: Ekvilibrado de Rapido kaj Rezolucio

La tensio aplikita dum elektroforezo rekte influas kaj la rapidecon ĉe kiu provaĵoj migras tra la ĝelo kaj la rezolucion de la apartigo. Por SDS-PAGE, estas konsilinde komenci kun malalta tensio de ĉirkaŭ 80V. Tiu komenca malalta tensio permesas al la provaĵoj migri malrapide kaj egale, koncentrante ilin en akra bendo kiam ili eniras la apartigantan ĝelon.

Post kiam la specimenoj plene eniris la apartigantan ĝelon, la tensio povas esti pliigita al 120V. Ĉi tiu pli alta tensio akcelas la migradon, certigante ke la proteinoj estas efike apartigitaj laŭ sia molekula pezo. Estas esence kontroli la progreson de la bromofenol blua tinkturfarbofronto, kiu indikas la kompletigon de la elektroforezo. Por ĝeloj kun koncentriĝo de 10-12%, 80-90 minutoj kutime sufiĉas; tamen, por 15% ĝeloj, vi eble bezonos plilongigi la rultempon iomete.

Administrado de Tempo: Sciante Kiam Ĉesi

Tempigo estas alia kritika faktoro en ĝelelektroforezo. Kuri la ĝelon dum tro longa aŭ tro mallonga periodo povas konduki al suboptimuma apartigo. La migrado de la bromofenola blua tinkturo estas utila indikilo: kiam ĝi atingas la fundon de la ĝelo, kutime estas tempo por ĉesigi la kuron. Por normaj ĝeloj, kiel ekzemple 10-12%, elektroforezdaŭro de proksimume 80-90 minutoj estas tipe adekvata. Por pli altaj procentaj ĝeloj, kiel 15%, la rultempo devus esti plilongigita por certigi kompletan apartigon de proteinoj.

Buffer Management: Reuzado kaj Preparado de Bufferoj

Elektroforeza bufro povas esti reuzita 1-2 fojojn, depende de la specifaj kondiĉoj de via laboratorio. Tamen, por optimumaj rezultoj, oni rekomendas prepari freŝan 10x-bufferon kaj dilui ĝin ĝuste antaŭ uzo. Ĉi tio certigas, ke la bufro konservas sian efikecon, kondukante al pli fidindaj elektroforezrezultoj.

2

Beijing Liuyi Biotechnology ĝelo elektroforezo produktoj

Singarde kontrolante la specimenan volumon, tension kaj elektroforezan tempon, vi povas signife plibonigi la precizecon kaj reprodukteblecon de viaj ĝelaj elektroforezrezultoj. Efektivigi ĉi tiujn plej bonajn praktikojn en via laboratorio laboro helpos vin atingi pli klarajn kaj pli distingajn bendojn, kondukante al pli bonaj datumoj por laŭflua analizo.

Se vi havas pli bonajn metodojn por optimumigi ĝelan elektroforezan eksperimenton, bonvenon diskuti kun ni!

Beijing Liuyi Biotechnology Co Ltd (Liuyi Biotechnology) specialiĝis pri fabrikado de elektroforezaj instrumentoj dum pli ol 50 jaroj kun nia propra profesia teknika teamo kaj R&D-centro. Ni havas fidindan kaj kompletan produktadlinion de dezajno ĝis inspektado, kaj magazeno, kaj ankaŭ merkatan subtenon. Niaj ĉefaj produktoj estas Electrophoresis Cell (tanko/ĉambro), Elektroforezo Elektroprovizo, Blua LED Transilluminator, UV Transilluminator, Ĝelo Bildo & Analiza Sistemo ktp Ni ankaŭ provizas la laboratoriaj instrumentoj kiel PCR-instrumento, vortico-miksilo kaj centrifugilo por laboratorio.

Se vi havas aĉetan planon por niaj produktoj, bonvolu ne hezitu kontakti nin. Vi povas sendi al ni mesaĝon retpoŝte[retpoŝto protektita][retpoŝto protektita], aŭ bonvolu voki nin ĉe +86 15810650221 aŭ aldoni Whatsapp +86 15810650221, aŭ Wechat: 15810650221.

Bonvolu Skani la QR-kodon por aldoni ĉe Whatsapp aŭ WeChat.

2


Afiŝtempo: Aŭg-20-2024