Principo
Celuloza acetatfilma elektroforezo estas elektroforezmetodo uzanta celulozan acetatfilmon kiel subtenon. La fenomeno en kiu ŝarĝitaj partikloj moviĝas direkte al la kontraŭa elektrodo sub la ago de elektra kampo estas nomita elektroforezo. Ĉar ĉiu proteino havas specifan izoelektran punkton, se proteino estas metita en solvaĵon kun pH pli malalta ol sia izoelektra punkto, la proteino estos pozitive ŝargita kaj moviĝos direkte al la negativa elektrodo. Male, ĝi moviĝas al la pozitiva poluso. Ĉar la rapideco de proteinmolekuloj moviĝantaj en elektra kampo rilatas al ilia ŝargo, la formo kaj grandeco de la molekuloj, malsamaj proteinoj povas esti apartigitaj per elektroforezo. Serumo enhavas diversajn proteinojn, kiuj ĉiuj havas izoelektran punktojn ĉe pH 7.5 aŭ malpli. Kiam serumo estas metita en pH 8.6-bufron por funkciigi elektroforezon, ĉiuj serumproteinoj estas negative ŝargitaj kaj moviĝos direkte al la pozitiva flanko en la kampo. Ĉar diversaj serumproteinoj havas malsamajn ŝargojn ĉe la sama pH, la molekulaj partikloj estas malsamaj en grandeco, kaj tiel la migra rapideco estas malsama, kaj ili estas apartigitaj per elektroforezo. La izoelektraj punktoj kaj molekulaj pezoj de serumproteinoj estas montritaj en la tabelo malsupre:
| Proteino | Izoelektraj punktoj (PI) | Molekula pezo |
| Albumino | 4.88 | 69 000 |
| α1-gloulino | 5.00 | 200 000 |
| α2-gloulino | 5.06 | 300 000 |
| β-gloulino | 5.12 | 9 000 ~ 150 000 |
| γ-gloulino | 6,85~7,50 | 156 000 ~ 300 000 |
La eksperimento estas apartigi malsamajn proteinojn en sangoserumo kun celuloza acetatmembrano (abbr. CAM) kiel subtenmedio. CAM estas speco de ŝaŭmaj loojefilmo kun bona uniformo, kaj la dikeco estas 0.1mm-1.5mm, kiu havas certan akvosorbadon.
Materialoj, instrumentoj kaj reakciiloj por CAM Elektroforezo
Specimenoj:sana homa sangoserumo
Instrumento:nutrado DYY-6C, elektroforeza tanko DYCP-38C, supera specimena ŝarĝo WD-9404
La reakciiloj
1) membrano de celuloza acetato 7X9cm
2) PH 8.6 barbitola bufrosolvo (jona forto 0.05-0.09, ĝi estas 0.06tid tempo.): prenu 1,84g dietil-barbituran acidon, kaj poste prenu 1,03g dietil-natrian pentobarbitalon, aldonu iom da distilita akvo por varmigi por solvi, kaj faru ĝis 1000 ml;
3) Makulo: Ponceau S 0.2g, Trichloroacetic 3g, aldonu 100ml distilita akvo;
4) TBS/T aŭ PBS/T: 45ml 95% etanolo, 5ml glacia aceta acido, aldonu 50ml distilita akvo;
5) Puriga Solvo: 70ml anhidra etanolo, 30ml glacia aceta acido.
Eksperimento Method
1) Preparu la membranon: Mergu la membranon en la barbitol-buffer-solvon 30min-8h, kaj elprenu ĝin, forigu la kroman solvon per sorba papero.
2) Ŝargado de specimenoj: Distingu la malglatan flankon kaj glatan flankon de la membrano, kaj marku linion je 1.5cm distanco al la supra fino sur la malglata flanko. Ŝarĝu specimenojn per supera specimena ŝarĝa ilo sur la malglata flanko. Noto: La specimenoj devas esti ŝarĝitaj sur la malglata flanko de membrano. Post kiam la serumaj specimenoj estas plene penetritaj en membranon, turnu la membranon, metu la malglatan flankon (kun specimenoj) vizaĝo malsupren al la tanko, kaj la fino kun specimenoj estas metita en negativan elektrodon.
3) Elektroforezo: Enŝaltu la nutradon, 0.4～0.6m A/cm-membrano, la kurada tempo estas 30-45 min. Post funkciigado de elektroforezo, malŝaltu la potencon.
4) Makulo kaj purigi: Elprenu la membranon el la tanko, kaj merguit en la tinkturfarban solvon dum 5 minutoj, kaj poste purigu ĝin en la purigan solvon ree kaj ree por 3-4 fojojn ĝis la fonkoloro estas klara. La serumaj proteinoj devas esti montritaj sur la bandoj, kaj kutime estas kvin zonoj, formas supran finon al la markita linio, Albumino, α1-gloulin, α2-gloulin, β-gloulin, γ-gloulin.
5) Konservado: metu la sekan elektroforezonbandoen purigan solvon dum 10-15 minutoj, kaj poste elprenu ĝin kaj algluu ĝin sur pura glaso, post kiam ĝi sekiĝos, ĝi fariĝos travidebla filmo.bando.
EksperimentoRezulto
La disiga efiko de serumaj specimenoj estas bona, kaj ne ekzistas fenomeno de benda vosto. La ripeteblo de la rezultoj varias pro la testaj proceduroj kaj la metodoj de la eksperimentisto, kaj la ripeteblo estas alta.
Konkludo
La rapida klinika elektroforez-detekta sistemo (Tanko de elektroforezoDYCP-38C,nutradoDYY-6C kaj supera specimena ŝarĝo WD-9404) produktita de niakompanio Beijing Liuyi Biotechnology Co., Ltdplenumas la eksperimentajn postulojn,kajla rezultoj estas reprodukteblaj, simplaj kaj rapidaj, taŭgaj porinstruadoesploro.
Pekino LiuyiBiotechnology Co., Ltd specialiĝas pri fabrikado de elektroforezaj produktoj por vivscienca industrio, kiuhavas pli ol 50-jaran historion en Ĉinio kaj la kompanio povas provizi stabilajn kaj altkvalitajn produktojn tra la tuta mondo. Tra jaroj da evoluo, ĝi estas inda je via elekto!
Ni nun serĉas partnerojn, ambaŭ OEM elektroforez-tanko kaj distribuistoj estas bonvenigitaj.
Por pliaj informoj pri ni, bonvolu kontakti nin retpoŝte[retpoŝto protektita]aŭ[retpoŝto protektita].
Afiŝtempo: Nov-14-2022