Gelelektroforezo estas unu el la plej gravaj metodoj uzitaj en molekula biologio por la analizo de DNA. Ĉi tiu metodo implikas la migradon de fragmentoj de DNA tra ĝelo, kie ili estas apartigitaj laŭ grandeco aŭ formo. Tamen, ĉu vi iam renkontis erarojn dum viaj elektroforezaj eksperimentoj, kiel ŝmiritaj bendoj sur la agarosa ĝelo, aŭ neniuj bandoj sur la ĝelo? Kio povus esti la kaŭzo de ĉi tiuj eraroj?
Niaj teknikistoj resumis kelkajn problemojn ĉi tie por via referenco.
1. Ŝmiritaj bendoj sur agarosa ĝelo
●La DNA estis degradita. Evitu nukleazajn poluadon.
● La elektroforeza bufro ne estas freŝa. Post ripeta uzo de elektroforeza bufro, la jona forto malpliiĝas, kaj ĝia pH-valoro pliiĝas, do la bufrokapacito malfortiĝas, kio influas la elektroforezan efikon. Oni rekomendas ofte anstataŭigi la elektroforezan bufron.
● Nekonvenaj elektroforezaj kondiĉoj estis uzataj. Ne permesu al tensio superi 20 V/cm, kaj konservi temperaturon <30°C dum elektroforezo. Por la giganta DNA-fadena elektroforezo, la temperaturo devus esti <15° C. Kontrolu, ke la elektroforeza bufro havas sufiĉe da bufrokapacito.
● Tro da DNA estis ŝarĝita sur la ĝelo. Malpliigu la kvanton de DNA.
● Tro da salo en la DNA. Uzu etanolan precipitaĵon por forigi troajn salojn antaŭen.
● La DNA estis poluita per proteino. Uzu fenol eltiroj por forigi proteinon en progresinta.
● La DNA estis denaturita. Ne varmigu antaŭ elektroforezo. Diluu DNA en bufro kun 20 mM NaCl.
2. Anomalioj DNA-banda migrado
● Renaturado de la COS-ejo de λHind III fragmento. Varmigu DNA dum 5 minutoj sub 65 ° C antaŭ elektroforezo, kaj poste malvarmigu ĝin sur glaciunuo dum 5 minutoj.
● Nekonvenaj elektroforezaj kondiĉoj estis uzataj. Ne permesu al tensio superi 20 V/cm, kaj konservi temperaturon <30°C dum elektroforezo. Kontrolu, ke la elektroforezbufro havas sufiĉe da bufrokapacito.
● La DNA estis denaturita. Ne varmigu antaŭ elektroforezo. Diluu DNA en bufro kun 20 mM NaCl.
3. Malfortaj aŭ neniaj DNA-bendoj sur agarosa ĝelo
● Estis nesufiĉa kvanto aŭ koncentriĝo de DNA ŝarĝita sur la ĝelo. Pliigu la kvanton de DNA. Poliakrilamida ĝelelektroforezo estas iomete pli sentema ol agarose elektroforezo, kaj specimena ŝarĝo povas esti reduktita taŭge.
● La DNA estis degradita. Evitu nukleazajn poluadon.
● La DNA estis elektroforigita de la ĝelo. Elektroforezu la ĝelon malpli da tempo, uzu pli malaltan tension aŭ uzu pli altan procentan ĝelon.
● Nekonvena W-lumfonto estis uzita por bildigo de etidiobromido-makula DNA. Uzu mallongan ondolongan (254 nm) W-lumon por pli granda sentemo.
4. DNA-bendoj mankas
●La etgranda DNA estis elektroforesita de la ĝelo. Elektroforezu la ĝelon malpli da tempo, uzu pli malaltan tension aŭ uzu pli altan procentan ĝelon.
● Malfacile distingi la DNA-bendojn de simila molekula. Pliigu la elektroforezan tempon, kaj kontrolu la koncentriĝonde la ĝelo por certigi ĝuste procento de ĝelo por esti uzata.
● La DNA estis denaturita. Ne varmigu antaŭ elektroforezo. Diluu DNA en bufro kun 20 mM NaCl.
● La DNA-fadenoj estas grandegaj, kaj konvencia ĝela elektroforezo ne taŭgas. Analizu pri pulsĝela elektroforezo.Kiajn aliajn problemojn vi havis kun agarosa ĝela elektroforezo? Ni esploros pli por gvidiloj estonte.
Beijing Liuyi biotechnology Co., Ltd (Liuyi Biotech) estas specialigita firmao fokusanta sur elektroforez-rilataj produktoj en Ĉinio. Ĝia rakonto komenciĝas en 1970 kiam Ĉinio ankoraŭ ne eniris la reformadon kaj malferman tempon. Tra la disvolvado de jaroj, Liuyi Bitotech havas sian propran markon, kiu estas konata kiel la Liuyi-Marko en enlanda merkato por elektroforezaj produktoj.
La marko Liuyi havas pli ol 50-jaran historion en Ĉinio kaj la kompanio povas provizi stabilajn kaj altkvalitajn produktojn tra la tuta mondo. Tra la disvolvado de jaroj, ĝi estas inda je via elekto!
La horizontalaj elektroforezaj ĉeloj (tankoj/kameroj) de Liuyi Biotech estas altkvalitaj kun bona aspekto. Kun malsamaj grandecoj de ĝelaj pletoj, ili povas plenumi viajn malsamajn eksperimentajn postulojn. Ni havas nian propran teknikan teamon kaj fabrikon. De dezajno ĝis fabrikado, la krudmaterialoj ĝis la ŝlosilaj partoj, ni povas kontroli la tutan procezon. La DYCP 31 serio estas por DNA-elektroforezo, kiuj estas modeloDYCP-31BN, DYCP-31CN,DYCP-31DN, kajDYCP-31E. La diferencoj inter ili estas ĝelaj grandecoj kaj prezo. Ni provizas plenajn grandecojn de produktoj por niaj klientoj. La modeloDYCP-32Cpovas fari la plej grandan ĝelon 250mm * 250mm.
Dume, ni rekomendas nian elektroforezan elektrofontonDYY-6C,DYY-6DkajDYY-10Cpor niaj elektroforezaj ĉeloj (tankoj/kameroj) DYCP-31 kaj 32 serioj.
Se vi volas pli da informoj pri la produktoj, bonvolu viziti ĉi tiun retejon por akiri pli, kaj bonvenon kontakti nin per retpoŝto por sciigi al ni, kion vi volas, kaj vidi ĉu ni povas provizi la solvojn por vi.
Por pliaj informoj pri ni, bonvolu kontakti nin retpoŝte[retpoŝto protektita], [retpoŝto protektita].
Afiŝtempo: majo-09-2022