Bazaj Teknikoj de Agarose Gel Elektroforezo (2)

Specimena Preparado kajŜarĝante

Pro la uzo de kontinua bufrosistemo sen stakiga ĝelo en la plej multaj kazoj, la specimenoj devus havi taŭgan koncentriĝon kaj malgrandan volumon. Uzu apipetomalrapide aldoni la specimenon, kun 5-10 μg po puto, por eviti gravan malkreskon de rezolucio. Kiamŝarĝo de specimeno, la nutrado devas esti malŝaltita. La specimeno devus enhavi indikan tinkturfarbon (0,025% bromofenol blua aŭ oranĝa) kaj sakarozon (10-15%) aŭ glicerolon (5-10%) por pliigi sian densecon, koncentri la specimenon kaj malhelpi disvastigon. Tamen, foje sakarozo aŭ glicerolo povas kaŭzi U-formajn bendojn en elektroforezrezultoj, kiuj povas esti evititaj uzante 2.5% Ficoll (polivinilpirolidono).

1

Elektroforezo

La tensio por elektroforezo estas 5-15 V/cm, ĝenerale ĉirkaŭ 10 V/cm. Por la apartigo de grandaj molekuloj, la tensio devus esti pli malalta, kutime ne superante 5 V/cm.

2

Makulado

Fluoreska tinkturfarbo etidiobromido (EB) estas ofte uzita por makulado por observi DNA-bendojn en agaroseĝelo. EB povas enigi inter bazparoj de DNA-molekuloj, igante EB ligi kun DNA. La sorbado de 260 nm ultraviola lumo de DNA estas transdonita al EB, kaj la ligita EB elsendas fluoreskecon je 590 nm en la ruĝ-oranĝa regiono de la videbla lumo-spektro. Makulado de la ĝelo en 1 mmol/L MgSO4-solvo dum 1 horo povas redukti fonan fluoreskecon kaŭzitan de nebindita EB, faciligante la detekton de malgrandaj kvantoj de DNA.

EB-farbo havas plurajn avantaĝojn: ĝi estas facile uzebla, ne rompas nukleajn acidojn, havas altan sentemon kaj povas makuli ambaŭ DNA kaj RNA. EB povas esti aldonita al la specimeno kaj spurita uzante UV-sorbadon iam ajn. Post makulado, EB povas esti forigita per eltiro kun n-butanolo.

Tamen, EB-tinkturo estas potenca mutageno, kaj antaŭzorgoj, kiel ekzemple portado de polietilenaj gantoj, devus esti prenitaj dum manipulado. Akridina oranĝo ankaŭ estas ofte uzata tinkturfarbo ĉar ĝi povas diferenciĝi inter unu-fadenaj kaj duoble-fadenaj nukleaj acidoj (DNA, RNA). Ĝi elmontras verdan fluoreskecon (530 Nm) por duoble-senhelpaj nukleaj acidoj kaj ruĝan fluoreskecon (640 Nm) por unu-senhelpaj nukleaj acidoj. Plie, aliaj tinkturfarboj kiel ekzemple metilenbluo, metilenverda, kaj kvinolino B povas esti uzitaj por makulado.

Beijing Liuyi Biotechnology Co Ltd (Liuyi Biotechnology) specialiĝis pri fabrikado de elektroforezaj instrumentoj dum pli ol 50 jaroj kun nia propra profesia teknika teamo kaj R&D-centro. Ni havas fidindan kaj kompletan produktadlinion de dezajno ĝis inspektado, kaj magazeno, kaj ankaŭ merkatan subtenon. Niaj ĉefaj produktoj estas Elektroforeza Ĉelo (tanko/kamero), Elektroforeza Elektroprovizo, Blua LED-Transilumilo, UV-Transilluminilo, Gela Bildo & Analiza Sistemo ktp.

3

Ni nun serĉas partnerojn, ambaŭ OEM elektroforez-tanko kaj distribuistoj estas bonvenigitaj.

Se vi havas aĉetan planon por niaj produktoj, bonvolu ne hezitu kontakti nin. Vi povas sendi al ni mesaĝon retpoŝte[retpoŝto protektita][retpoŝto protektita], aŭ bonvolu voki nin ĉe +86 15810650221 aŭ aldoni Whatsapp +86 15810650221, aŭ Wechat: 15810650221.

Bonvolu Skani la QR-kodon por aldoni ĉe Whatsapp aŭ WeChat.

2


Afiŝtempo: Dec-20-2023