1. Klasifiko
Ĝela elektroforezo estas dividita en vertikalajn tipojn (inkluzive de kolumnaj ĝeloj kaj slabaj ĝeloj) kaj horizontalaj tipoj (ĉefe slabaj ĝeloj) (Figuro 6-18). Ĝenerale, vertikala apartigo estas iomete pli bona ol horizontala, sed horizontala ĝelpreparo havas almenaŭ kvar avantaĝojn: ekzistas subteno sub la tuta ĝelo, permesante la uzon de malalt-koncentriĝinta agarozo; eblas prepari agarozaj ĝelaj teleroj de malsamaj specifoj; ĝela preparado kaj specimena ŝarĝo estas pli oportunaj; la elektroforezkamero estas facile konstruebla kaj kostefika. Ĉar horizontala elektroforezo estas farita kun la agarosa ĝelplato plene subakvigita proksimume 1 mm sub la surfaco de la elektroforezbufro, ĝi ankaŭ estas nomita submara elektroforezo.
Tanko de elektroforezo DYCP-31DN por elektroforezo de agarose-ĝelo
2.Buffera Sistemo
En nukleaacida apartigo, la plej multaj sistemoj adoptas kontinuajn sistemojn. Ofte uzataj elektroforezaj bufroj inkluzivas TBE (0.08mol/L Tris·HCl, pH 8.5, 0.08mol/L borata acido, 0.0024mol/L EDTA) bufro kaj THE (0.04mol/L Tris·HCl, pH 7.8, 0.02mol/L). natria acetato, 0.0018mol/L EDTA) bufro. Ĉi tiuj bufroj estas ĝenerale preparitaj kiel 10x akciaj solvaĵoj kaj diluitaj al la bezonata koncentriĝo kiam ili estas uzataj. La migradrapidecoj de linia kaj cirkla DNA en agaroseĝelo varias laŭ la bufro uzita. En LA bufro, la migradrapideco de linia DNA estas pli granda ol tiu de cirkla DNA, dum en TBE-bufro, la malo estas vera.
3.Preparo de Agarose Gel
(1) Preparado de Horizontala Agarose Gel
(a) Preparu la bezonatan koncentriĝon de agarosa ĝelo per 1x elektroforezbufro.
(b) Varmigu la agarozon ĝis kompleta dissolvo aŭ en bolanta akvobano, sur magneta kirlilo, aŭ en mikroondo. Malvarmu la agarozan solvon al 55 °C kaj aldonu etidiobromidan (EB) tinkturon al fina koncentriĝo de 0,5 μg/ml.
(c) Sigelu la randojn de vitro aŭ akrilaj teleroj per malgranda kvanto da agarosa ĝelo, aldonu kombilon kaj poziciigu la kombildentojn ĉirkaŭ 0,5~1,0 mm super la telero.
(d) Verŝu la fanditan agarozĝelan solvon senĉese en la vitron aŭ akrilan platan ŝimon (la dikeco dependas de la volumeno de la DNA-provaĵo), evitante la enkondukon de aervezikoj. Lasu ĝin solidigi nature ĉe ĉambra temperaturo.
(e) Zorge forigu la kombilon post kompleta solidiĝo. Aldonu taŭgan kvanton da elektroforezbufro al la ĝela tanko, certigante, ke la ĝela plato estas mergita ĉirkaŭ 1 mm sub la surfaco de la elektroforezbufro.
(2) Preparado de Vertikala Agarose Gel
(a) Forigu grason aŭ restaĵon de vitraj platoj per lavado per etanolo.
(b) Metu interspacigajn platojn inter antaŭaj kaj malantaŭaj digoj, vicigu la randojn de la disigiloj kun la antaŭaj kaj malantaŭaj digoj, kaj sekurigu ilin per krampoj.
(c) Aldonu 2% agarozon en 1x bufro inter la randoj de la disigplatoj por formi 1 cm altan agarozon ĉe la fundo de la ĝela kamero.
(d) Verŝu la fanditan agarozĝelon ĉe la dezirata koncentriĝo, preparita en 1x bufro, en la ĝelan ĉambron ĝis 1 cm sub la supro.
(e) Enmetu la kombilon, evitante kapti aervezikojn sub la kombildentoj. Kelkfoje, sulkoj povas aperi ĉe la kombildentoj dum agaroseĝela malvarmigo; en tiaj kazoj, simple aldonu iom da fandita agarozo ĉe la supro por solidigi ĝin.
(f) Forigu la kombilon. Por malhelpi bufrofluon en la ŝarĝa fendo, sigelu la ligon inter la agarosa ĝela plato kaj la elektroforezkamero kun 2% agarozo kaj aldonu la bezonatan kvanton da bufro.
(g) Aldonu 1x elektroforezan bufron al la ĝela ĉambro.
(h) Zorge ŝarĝu DNA-provaĵojn sur la agarozĝelon sub la bufro.
Pli da informoj pri la baza scio pri agarose-ĝela elektroforezo, ni dividos la venontan semajnon. Deziru, ke ĉi tiuj informoj estu utilaj al via eksperimento.
Beijing Liuyi Biotechnology Co Ltd (Liuyi Biotechnology) specialiĝis pri fabrikado de elektroforezaj instrumentoj dum pli ol 50 jaroj kun nia propra profesia teknika teamo kaj R&D-centro. Ni havas fidindan kaj kompletan produktadlinion de dezajno ĝis inspektado, kaj magazeno, kaj ankaŭ merkatan subtenon. Niaj ĉefaj produktoj estas Elektroforeza Ĉelo (tanko/kamero), Elektroforeza Elektroprovizo, Blua LED-Transilumilo, UV-Transilluminilo, Gela Bildo & Analiza Sistemo ktp.
Ni nun serĉas partnerojn, ambaŭ OEM elektroforez-tanko kaj distribuistoj estas bonvenigitaj.
Se vi havas aĉetan planon por niaj produktoj, bonvolu ne hezitu kontakti nin. Vi povas sendi al ni mesaĝon retpoŝte[retpoŝto protektita]aŭ[retpoŝto protektita], aŭ bonvolu voki nin ĉe +86 15810650221 aŭ aldoni Whatsapp +86 15810650221, aŭ Wechat: 15810650221.
Bonvolu Skani la QR-kodon por aldoni ĉe Whatsapp aŭ WeChat.
Afiŝtempo: Dec-07-2023